西安高效液相色谱柱如何选择? 怎样选择色谱柱? 现代高效液相色谱中,分离效果好坏的一个重要指标是色谱填的选择。但是色谱填料的选择范围很宽,因此,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。
一. 硅胶基质填料
1.正相色谱
正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团胺基团,如(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。
由于硅胶表面的硅轻基(SiOH)或其他极性基团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组份的极性大小,即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正己烷(Hexane)、氯仿(Choroform)、二氯甲烷 (Methylene Cloride)等。
2.反相色谱
反相色谱用的填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。
反相色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲掖与甲醇、乙情等的混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组份最先被冲洗出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反相填料有:C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C6H,(Phenyl)等。>>西安色谱试剂
二.聚合物填料
西安高效液相色谱柱如何选择? 聚合物填料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸醋等,其主要优点是在pH值为1一14均可使用。
相对于硅胶基质的C18填料,这类填料具有更强的疏水性;大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。
西安高效液相色谱柱如何选择? 现有的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料,色谱柱柱效较低。
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