水果、蔬菜制品铜含量的测定——光度法

本标准等效采用国际标准ISO 3094-1974《水果、蔬菜制品 铜含量的测定--光度法》 。

1 主题内容与适用范围 本标准规定了水果、蔬菜制品铜含量测定方法。本方法适用于水果、蔬菜制品,包括各种酱、泥、果汁和蔬菜汁等铜含量的测定。 注：铋和碲干扰本方法测定。

2 引用标准 GB 12283 水果、蔬菜及制品中有机物的分解方法

3 原理 样品中的有机物被分解后,用碱溶液中和分解时的酸溶液试样中的铜离子与二乙基二硫代氨基甲酸钠作用,生成棕黄色络合物,用三氯甲烷或四氯化碳提取铜络合物,测定该络合物的呈色强度。推荐阅读>>什么壳二糖标准品？

4 试剂 所有的试剂均为分析纯。均使用蒸馏水或相同纯度的水。

4.1 三氯甲烷或四氯化碳(GB 682或GB 688),无碳酸。

4.2 无水甲醇(GB 683)。

4.3 氨水(GB 631),比重0.88g/mL。

4.4 柠檬酸铵-乙二胺四乙酸钠盐溶液 溶解20g柠檬酸铵(Q/HG 12-256)和5g乙二胺四乙酸钠盐(GB 1401)于水中并稀释 至100mL。

4.5 二乙基二硫代氨基甲酸钠(HG 3-962)溶液5g/L 在25～30℃水浴中加热可加快试剂溶解。本溶液应在一周内使用,在冰箱中保存。

4.6 铜标准溶液相当于0.01g/L。 溶解0.196g硫酸铜(CuSO4·5H2O)于水中,加几滴比重1.84g/mL的硫酸,用水稀释至 500mL,混匀。再分取10mL,用水稀释至100mL,本溶液含铜10μg/mL。

4.7 百里酚蓝指示剂(C27H2905SNa) 加温溶解0.1g百里酚蓝于8.6mL的0.1 mol/L氢氧化钠溶液和10mL的96%(υ/υ)乙 醇中,用20%(υ/υ)乙醇稀释至250mL。

5 仪器、设备

5.1 短颈分液漏斗;

5.2 分光光度计 备有 10或20mm比色杯,在波长435nm测定。

6 分析步骤

6.1 试样分取和有机物分解 参见GB 12283。 有机物分解前,样品在磨碎和过筛时应避免使用铜制品设备。

6.2 铜络合物的形成和提取 预计样品中铜含量低于50μg时,则使用全部溶液(6.1),预计样品中铜含量较高时,用水稀释溶液(6.1)至100mL并从中适量分取。 分解液冷却后,用30～40mL水稀释溶液,把溶液转入分液漏斗(5.1),依次加入20mL柠檬酸铵-乙二胺四乙酸钠盐(EDTA)溶液(4.4)、5mL氨水溶液(4.3)、2滴百里酚蓝指示剂(4.7)和足量的氨水溶液(4.3),使溶液的颜色由黄变蓝(pH8至9.6)。在流水中冷却,不时的松动分液漏斗瓶塞。加入2mL二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液(4.5),准确加入10mL三氯甲烷或四氯化 碳(4.1),振摇5min,静置分层。用滤纸或脱脂棉擦干分液漏斗。把含铜络合物的三氯甲烷或四氯化碳提取液放到试管中,避光保存。放置片刻使痕量水分出来,经滤纸过滤到另一试管中以除去痕量水。加入0.5mL无水甲醇(4.2),测定前在暗处放置2h,在亮处放置1h(避免直射光)。

6.3 空白试验 按6.1和6.2样品测定方法同时进行,但不加样品。

6.4 测定 用分光光度计(5.2),以空白试验(6.3)为对照,在435nm处测定三氯甲烷或四氯化碳提取 液(参见6.2)中铜络合物的颜色强度。

6.5 标准曲线的绘制 进行有机物分解后,吸取1,2,3,4,5mL铜标准溶液(4.6),分别含10,20,30,40,50μg铜, 同样按试样的方法处理,分别进行测定。吸光度值与对应的铜微克数绘制标准曲线。 同时按6.3配制空白溶液并按6.4进行测定。标准曲线与试样测定液同时制备时,无须单独做空白溶液。

7 结果表示

7.1 计算方法和公式 按标准曲线把6.4的测量值换算成铜的微克数。样品中铜含量(mg/kg),按下式计算:

100   C

铜(mg/kg)=───×───

υ    m

式中:υ--从溶液(6.1)中用于测定的体积,mL; C--标准曲线上查得的铜含量,μg; m--样品的质量,g。 取两次算术平均值作为分析结果。

7.2 允许差 同一分析者同时或快速连续进行两次测定其结果的差异,铜含量小于或等于5mg/kg时,不超过0.2mg/kg,铜含量更高时,平均值不超过5%。

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附加说明:

本标准由中华人民共和国农业部提出。

本标准由中国农业科学院分析测试中心负责起草。

本标准主要起草人李伟格、陈必芳、顾君华。